谢曙英
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：江苏省寄生虫病防治研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科技厅公益专项江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 曼氏血吸虫虫卵蛋白IPSE基因合成、表达及特性分析被引量：2
- 2010年
- 目的合成并表达曼氏血吸虫虫卵白介素4诱导物(IPSE)基因,并对其免疫特性进行分析。方法应用重叠PCR方法合成曼氏血吸虫IPSE基因,将其定向克隆至表达载体pET32a(+)的硫氧还蛋白(Trx)序列下游,构建重组表达质粒IPSE/pET32a(+)。将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,表达Trx-IPSE融合蛋白。大量制备表达产物,用镍螯合亲和层析胶在变性条件下纯化重组Trx-IPSE融合蛋白。用大量PBS对变性融合蛋白进行透析,获得部分复性的可溶性Trx-IPSE融合蛋白。应用蛋白质印迹(Westernblotting)分析其是否能被慢性日本血吸虫病患者血清中IgG抗体所识别,及其与健康人血清中IgE抗体的结合能力。结果人工合成的IPSE基因序列与天然基因序列完全一致。经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,含重组质粒的转化子细菌能表达相对分子质量(Mr)约35700的蛋白分子,与预计Trx-IPSE融合蛋白的相对分子质量大小相符。Westernblotting分析结果显示,变性的和复性的Trx-IPSE融合蛋白均能被慢性日本血吸虫病患者血清中IgG抗体识别,融合蛋白Trx-IPSE能与健康人血清中IgE抗体非特异性结合。结论曼氏血吸虫IPSE基因合成获得成功,重组表达的IPSE具有与天然抗日本血吸虫抗体反应和与IgE非特异性结合的能力。
- 谢曙英陈红根余传信殷旭仁华万全曾小军梁幼生高琪
- 关键词：曼氏血吸虫基因合成功能分析
- 血吸虫虫卵蛋白IPSE基因合成、表达及功能分析
- 血吸虫病是一种危害人类健康的重要的地方性传染病。血吸虫之所以能长期寄生于人体内,主要的原因是血吸虫成虫和虫卵的排泄分泌抗原能够诱导宿主的免疫系统发生免疫反应类型的偏移,由感染初期的具有抗血吸虫感染功能的Th1型保护性免疫...
- 谢曙英
- 关键词：血吸虫基因合成功能分析
- 文献传递
- 日本血吸虫硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶基因克隆和序列分析被引量：4
- 2008年
- 目的克隆日本血吸虫硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶(SjTGR)基因,并进行序列分析。方法制备日本血吸虫成虫mRNA,反转录合成cDNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术,从日本血吸虫成虫cDNA中扩增出SjTGR基因片段。通过TA克隆技术将该基因片段克隆到pGEM-T载体中进行DNA序列测定和生物信息学分析。结果采用PCR技术成功地从日本血吸虫成虫cDNA中扩增出TGR基因片段,TA克隆后DNA序列分析显示该基因长度为1791bp,编码596个氨基酸残基,理论分子质量65kDa,生物信息学分析显示与曼氏血吸虫TGR氨基酸序列同源性为82%,含有吡啶核苷酸二硫化物氧化活性中心CVNVGC序列,在氨基端含有谷氧还蛋白特征性的活性位点CPFC基序。结论SjTGR基因克隆获得成功,为发展抗日本血吸虫新药及疫苗候选分子奠定了基础。
- 谢曙英殷旭仁华万全曾小军陈红根梁幼生高琪余传信
- 关键词：日本血吸虫基因克隆
