王学路
- 作品数：23 被引量：43H指数：3
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市科技人才计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 优良土著大豆根瘤菌的分离筛选、匹配与应用研究
- 伍惠钟喆栋樊伟彭亚齐杜思曾小波张豹陈大松王学路李友国
- 油菜素甾醇信号通路中BKI1互作蛋白Hsp70的筛选与鉴定被引量：1
- 2015年
- 植物激素油菜素甾醇(Brassinosteroids,BRs)在植物生长发育过程中起着重要作用.BKI1和14-3-3蛋白都具有正负调控BR信号通路的双重功能.为了进一步研究BKI1调控BR信号通路的分子机制,本研究用BKI1的过表达植株35S∶∶BKI1-FLAG进行液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析BKI1复合体组分,发现BKI1复合体中含有分子伴侣Hsp70.BKI1与Hsp70共定位在细胞膜和细胞质上.FoldIndex工具预测发现BKI1存在内在无序区域(Intrinsically Disordered Regions,IDR),表明在细胞中BKI1可能需要Hsp70帮助其正确折叠.半体内pull-down和双分子荧光互补实验(BiFC)表明BKI1可以与Hsp70在植物体内互作.同时,截短实验结果表明BKI1与Hsp70的底物结合结构域相互作用,是Hsp70的底物.
- 杨秦张弛蒋建军王学路
- 关键词：HSP70
- LRR受体蛋白基因HSL2存在自然反义转录本的初步分析
- 2015年
- 自然反义转录本(Natural Antisense Transcripts,NAT)是一类与编码蛋白的mRNA互补的转录本.基于生物信息学,Tilling arrays和高通量测序等方法发现在人类、小鼠和植物基因组中NAT存在广泛的表达.本实验发现在拟南芥基因组中富亮氨酸重复类受体蛋白激酶(LRR-RLK)和富亮氨酸重复类受体蛋白(LRRRLP)家族基因中分别有22和14个基因存在NAT的表达.通过半定量RT-PCR和荧光定量PCR(Real-time PCR)等技术验证了NAT的存在.通过快速扩增cDNA末端(3’RACE)方法进一步确认了NAT的存在并且获得了这些NAT的3’末端序列.过表达LRR-RLK家族调控拟南芥花瓣脱落HSL2基因位点的NAT能够降低HSL2和它的同源基因HAE的表达.
- 胡成国苏伟王学路
- 关键词：半定量RT-PCR荧光定量PCR
- 油菜素甾醇信号通路转录因子BES1参与调控独脚金内酯信号所介导的植物分枝
- 独脚金内酯(Strigolactones,SLs)是一类新近发现的调控植物整体株型的重要激素,尤其是在植物的分枝(分蘖)调控方面具有突出的作用.对于其信号转导机制的研究是当前植物生物学领域最热门的研究方向之一.
- 王园孙世勇朱文姣贾坤鹏杨洪全王学路
- 关键词：信号转导通路MAX2
- 油菜素甾醇信号通路中BKI1互作蛋白ERD7的筛选与鉴定被引量：1
- 2014年
- 油菜素甾醇(Brassinosteroid,BR)是一类重要的调控植物生长发育的激素,BKI1在BR信号转导通路中具有正负调控的双重功能.为了深入研究BK11正/负调控BR信号通路的分子机制,本研究使用BKI1作为诱饵蛋白对拟南芥cDNA文库进行酵母双杂交筛选,获得了一段新的与BR信号通路组分BKI1相互作用的肽段,BLAST搜索显示该肽段与拟南芥ERD7的N端序列一致.生物信息学分析表明ERD7是一个植物特异表达基因,在单子叶、双子叶、以及低等植物中保持很高的一致性.酵母双杂交方法证实全长ERD7与BKI1能够相互作用,Pull-down分析证实这两个基因在植物体内直接相互作用,烟草细胞瞬时表达显示ERD7和BKI1能够共定位于细胞质和细胞膜.BKI1和ERD7相互作用的发现为进一步研究BKI1的调控机制奠定了基础.
- 程鳞张弛蒋建军苏伟王学路
- 关键词：酵母双杂交
- 大豆基因共表达网络分析揭示豆科根瘤的进化机制
- 豆科植物，尤其是大豆，是重要的经济作物。不同于大多数非豆科作物，豆科植物能与根瘤菌的相互作用共生形成根瘤，从而通过生物固氮为植物提供可利用的氮源。在生产上豆科作物的种植可以大量减少氮肥的施加，从而减少对环境的污染。
- 吴智华王学路
- 关键词：豆科大豆根瘤进化
- 一种控制水稻叶片直立性发育的基因及其应用
- 本发明提供了一种控制禾本科作物株型建成的基因及其应用，本发明的公开的基因<I>CYC </I><I>U4;1</I>（<I>Os10g41430</I>）特异在水稻叶枕表达（相信也特意在其他禾本科作物表达），其CDS序列...
- 王学路孙世勇
- 文献传递
- 拟南芥Patellin2相互作用蛋白的筛选及鉴定被引量：1
- 2016年
- Patellin 2(PATL2)蛋白是具有SEC14蛋白结构域的脂质转移蛋白,定位于细胞分裂后期的细胞板上,在细胞分裂过程中发挥重要的作用.同时,PATL2蛋白还受到植物激素和环境变化的调控,说明PATL2可能在植物激素和环境变化的调控下参与细胞分裂过程.为了深入了解PATL2蛋白的生物学功能,研究PATL2蛋白发挥作用的分子生物学机制,我们分析了它在植物体内的表达特点和与之相互作用的蛋白.我们通过免疫共沉淀与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析了过表达PATL2的转基因植株,并获得了多个可能与PATL2相互作用的蛋白,其中一个是细胞周期蛋白依赖性激酶CDKB2;2.通过观察PATL2启动子驱动的GUS报告基因在植物中的表达,发现PATL2基因在叶片、花瓣、花粉中广泛表达,但在角果中的表达非常有限,仅存在于角果的两端,这与已报道的CDKB2;2的组织分布部分相同.同时,烟草叶表皮细胞瞬时表达结果表明PATL2和CDKB2;2能够共定位于烟草叶表皮细胞的细胞膜和细胞质中.体外pull-down实验和双分子荧光互补实验(BiFC)实验分别确定了PATL2和CDKB2;2在植物体外和植物体内的相互作用.
- 李琼王学路苏伟
- 关键词：蛋白质相互作用
- 一种控制水稻株高或叶片直立性发育的基因及其应用
- 本发明公开了一种控制水稻株高或叶片直立性发育的基因及其应用，本发明的公开的基因<I>RLA1</I>在水稻油菜素甾醇的信号转导途径中起重要作用，其CDS序列为SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸序列为SEQ ID N...
- 王学路孙世勇乔胜龙
- 拟南芥RabA2b互作蛋白的筛选与鉴定被引量：1
- 2016年
- Rab蛋白家族在调控细胞囊泡的运输过程中发挥着重要作用.拟南芥中存在数量庞大的RabA亚族成员,它们参与调控植物不同阶段的生长发育过程.为了寻找拟南芥RabA亚族下游的调节蛋白或效应蛋白,进而阐明RabA在细胞活动中的角色,本研究选取RabA2b蛋白进行了深入研究.本研究首先构建过表达RabA2b的拟南芥植株,同时结合免疫共沉淀方法和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测到多个Hsp70蛋白家族成员与RabA2b蛋白共沉淀.为了进一步研究Hsp70成员与RabA2b的相互关系,将5个细胞质和细胞核定位的Hsp70s蛋白分别构建于植物表达载体,通过在烟草叶表皮细胞中瞬时表达Hsp70s和RabA2b发现它们共定位于细胞质膜、细胞质以及细胞核周围的丝状结构.同时,体外pull-down实验证明了5个Hsp70s蛋白都能与RabA2b蛋白直接相互作用.此外,双分子荧光互补实验(BiFC)进一步证实了Hsp70s与RabA2b在烟草叶表皮细胞中的相互作用,说明拟南芥中细胞质和细胞核定位的Hsp70s可以作为RabA2b的调节蛋白或效应蛋白一同调控植物的生长发育过程.
- 冷琳娜蒋建军张弛王学路苏伟
- 关键词：HSP70相互作用
