王喜军
- 作品数：62 被引量：196H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 表达西尼罗热病毒PrM/E蛋白的重组新城疫LaSota疫苗株
- 本发明成功构建了表达西尼罗热病毒(West Nile virus，WNV)PrM/E蛋白的重组新城疫病毒LaSota疫苗株rLa-WNV-PrM/E，其保藏号为CGMCC No.10199，并在小鼠模型中系统评价了重组病...
- 步志高温志远葛金英华荣虹王喜军
- 文献传递
- 抗埃博拉病毒VP40蛋白单克隆抗体的制备及在抗原捕捉ELISA中的应用被引量：9
- 2008年
- 本研究以原核表达、纯化的扎伊尔株埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)VP40蛋白片段免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,获得一株分泌抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系。以重组杆状病毒表达EBOV VP40蛋白为抗原,经Western blot和间接免疫荧光检测该单克隆抗体显示出良好的特异性免疫反应。采用该株杂交瘤细胞系经腹腔注射接种8日龄BALB/c小鼠,制备腹水,并经纯化和HRP标记,获得HRP标记的抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体。从而,初步建立一种抗原捕捉ELSIA诊断方法,以原核表达EBOV VP40蛋白片段兔抗血清为一抗,应用HRP标记的抗EBOV VP40蛋白单克隆抗体检测杆状病毒表达的重组EBOV VP40蛋白显示出良好的敏感性和特异性。结果表明,初步建立的抗原捕捉ELSIA诊断方法有希望成为一种理想的检测EBOV感染的诊断方法。
- 王淑杰王喜军胡森秦立廷林祥梅步志高
- 关键词：单克隆抗体
- 狂犬病毒Evelyn-Rokitnicki-Abelseth(ERA)减毒活疫苗候选株的构建与筛选
- 本发明涉及一种狂犬病毒减毒疫苗突变株，其中狂犬病毒的糖蛋白的333位点由精氨酸突变为谷氨酸。本发明还涉及该狂犬病毒减毒疫苗突变株的制备方法和应用。
- 步志高夏咸柱葛金英王喜军杨松涛冯娜
- 犬瘟热病毒CDV/R-20/8疫苗株的反向遗传操作系统及其应用
- 本发明涉及一种犬瘟热病毒(Canine distemper virus，CDV)CDV/R-20/8疫苗株的反向遗传操作系统及其应用，该系统包含：转录质粒，所述转录质粒能够表达所述犬瘟热病毒CDV/R-20/8疫苗株的基...
- 步志高夏咸柱王喜军冯娜葛金英高玉伟
- 文献传递
- 嵌合狂犬病病毒株rLEP333Q-L(H)的构建及其生物学功能的研究
- 本发明属于重组病毒疫苗领域。本发明涉及一株嵌合狂犬病病毒rLEP333Q-L(H)弱毒疫苗株，其表达的狂犬病病毒rLEP糖蛋白第333位精氨酸(Arg)突变为谷氨酰胺(Gln)，同时将L基因替换为HEP的L基因。本发明还...
- 步志高陶丽红葛金英王喜军
- 文献传递
- 表达狂犬病病毒ERA株糖蛋白重组新城疫病毒活载体疫苗的构建及对小鼠的免疫原性研究
- 在新城疫病毒LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统的基础上,构建表达狂犬病病毒ERA株糖蛋白的重组新城疫病毒rLa-ERA-GP,并探索rLa-ERA-GP对小鼠免疫原性.利用RT-PCR技术,从狂犬病病毒ERA疫苗株上...
- 马良王琪田美杰王喜军翟洪月于文会葛金英步志高
- 关键词：狂犬病病毒重组新城疫病毒糖蛋白表达活载体疫苗免疫原性
- 文献传递
- 马耳它布氏杆菌bp26基因缺失株的构建及鉴定被引量：18
- 2009年
- 为了建立马耳他布氏杆菌M5-90株弱毒疫苗株与野生株的鉴别诊断,本研究以bp26基因作为重组靶位点,以M5-90为亲本,利用bp26基因ORF外侧序列作为同源序列,将卡那霉素抗性基因(Kanr)整合到细菌基因组中,双交叉重组阳性菌株,经SDS-PAGE和western blot试验表明迁移率约为29ku的BP26蛋白在亲本菌中表达并可被鼠抗BP26高免血清识别,而突变株M5-90-26反应结果为阴性,表明BP26蛋白在突变疫苗株M5-90-26中未表达。M5-90-26具备从血清学角度区分M5-90-26免疫与野生型布氏杆菌感染,对布氏杆菌病防制、监测及净化具有重要的意义。
- 胡森郑孝辉王加兰张倩刘文兴王喜军乔祖建刘林涛高红霞王君伟步志高
- 关键词：突变株
- 鸡SIgA重链单克隆抗体的制备及新城疫病毒和禽流感病毒特异黏膜SIgA检测方法的建立被引量：1
- 2012年
- 为建立快速检测禽类黏膜组织中SIgA含量的方法,本研究原核重组表达鸡SIgA重链片段蛋白,纯化后免疫BALB/c鼠。以鸡胆汁中分离纯化的SIgA作为检测抗原,常规单克隆技术筛选出1株能够稳定分泌抗鸡SIgA单克隆抗体(MAb)的IgG2a、κ型MAb。经ELISA和western blot分析,所获得的1株MAb亲和力高、特异性强;采用生物素标记纯化MAb腹水IgG为检测二抗,以禽流感-新城疫重组二联活载体疫苗免疫SPF鸡为模型,初步建立了新城疫病毒和H5亚型禽流感病毒特异的黏膜SIgA间接ELISA检测方法。本研究为开展特异性家禽黏膜免疫机制的研究提供了重要技术手段。
- 肇慧君陈伟业葛金英王喜军步志高
- 关键词：SIGA单克隆抗体新城疫病毒H5亚型禽流感病毒
- 杆状病毒表达SARS冠状病毒核蛋白作为诊断抗原的研究
- 研究结果表明,昆虫细胞表达的重组SARS-CoV N蛋白具有免疫反应原性良好,制备简便,来源丰富,有望替代VeroE6细胞生产的SARS-CoV全病毒抗原,研制安全经济、敏感特异的ELISA和IFA诊断试剂,应用于动物或...
- 胡森王喜军王清华邓国华王笑梅吴东来步志高
- 关键词：杆状病毒SARS冠状病毒诊断抗原严重急性呼吸道综合症昆虫细胞
- 文献传递
- 牛γ-干扰素在重组杆状病毒中的表达及其抗病毒活性的测定被引量：8
- 2007年
- 研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建含有牛γ-干扰素(Bovine interferon-γ,BoIFN-γ)完整开放阅读框的供体质粒pFastBacTM1-BoIFN-γ,转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-BoIFN-γ,转染sf9昆虫细胞救获表达BoIFN-γ的重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ。采用抗BoIFN-γ单克隆抗体作为一抗进行间接免疫荧光(IFA)及间接ELISA检测,表明BoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达。利用VSV*GFP-MDBK细胞系统测定rBoIFN-γ抗病毒活性,重组杆状病毒表达重组BoIFN-γ(rBoIFN-γ)能有效抑制水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上的复制,rBac-BoIFN-γ感染sf9昆虫细胞上清抗病毒活性为2×105IU/mL,而且其抗病毒活性可以被鼠抗原核表达重组BoIFN-γ免疫血清阻断。结果表明:rBoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ感染的sf9昆虫细胞中获得良好表达,并具有高效抗病毒活性。
- 秦立廷王喜军胡森刘思当步志高李志中陈伟业葛金英
- 关键词：Γ-干扰素重组杆状病毒抗病毒活性
