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常晨: 作品数：26 被引量：47H指数：4; 供职机构：江苏省农业科学院更多>>; 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金公益性行业(农业)科研专项江苏省科技支撑计划项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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提高猪圆环病毒2型产量的方法比较: 2015年; 为了获得较高的病毒滴度,降低疫苗成本,选用4种刺激剂:二磷酸氯喹(CQ)、刀豆素(Con A)、D-氨基葡萄糖(D-G)和β-甲基-环糊精(MβCD),采用单独刺激和联合刺激感染PCV2的PK-15细胞,研究PCV2增殖情况。结果显示,MβCD和D-G单独作用均能显著促进PCV2的感染和复制,且效果优于另外2种单独作用;采用3 mmol/L D-氨基葡萄糖和2.5 mmol/L MβCD联合作用方法,在病毒5次传代期间病毒滴度显著高于单独作用组,最高滴度达到107.3TCID50/m L,该法有助于提高PCV2复制效率,提高疫苗的产量。; 华涛张雪花唐波常晨刘国阳冯磊吴培培张道华侯继波; 关键词：PCV2 病毒滴度 D-氨基葡萄糖

猪伪狂犬病病毒野毒SYBR-Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立被引量：2: 2017年; 根据猪伪狂犬病病毒(PRV)g I/g E基因序列,设计一对特异性引物,建立了鉴别PRV野毒感染的荧光定量PCR方法。该方法灵敏度达到102拷贝/μL,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、乙脑病毒(JEV)不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;用PRV强毒攻毒仔猪,荧光定量PCR比普通PCR能更灵敏检出组织带毒量。该方法可以用于猪的组织样品,如脑、肺、扁桃体、淋巴结等样品中伪狂犬野毒的定量,可用于临床伪狂犬野毒感染的早期检测和定量分析猪伪狂犬病毒感染程度。; 常晨张道华唐波刘国阳华涛侯继波; 关键词：猪伪狂犬病病毒荧光定量PCR 野毒

猪细小病毒1~7型全基因组遗传变异被引量：1: 2024年; 猪细小病毒1型(porcine parvovirus type 1,PPV1)是母猪繁殖失败的主要病原体,即通常所称的猪细小病毒。2001—2016年,在猪体相继鉴定出了6种新型猪细小病毒,分别被命名为猪细小病毒2~7型(PPV2~PPV7型)。为确定中国江苏地区PPV1~PPV7型感染情况和遗传变异特征,采用PPV1~PPV7型常规PCR检测方法,从江苏地区猪场收集到2株PPV1、2株PPV2,以及PPV3、PPV4、PPV5、PPV6、PPV7各1株阳性组织病料,对这9株阳性组织病料进行全基因组测序,采用生物信息分析软件与GenBank中PPV1~PPV7型参考毒株进行比较,系统分析全基因组和衣壳蛋白2(VP2)的遗传进化分子特征。结果表明,PPV1~PPV7型测序毒株与GenBank中同型毒株全基因组同源性均高于97%,而不同型基因组间同源性均小于60.40%。PPV1~PPV7型测序毒株的VP2氨基酸序列与同型毒株同源性均高于97%,但不同型毒株之间差异巨大,PPV4与PPV5有55%同源性,其他毒株之间同源性更低,仅为9%~17%。毒力分析结果表明,2株PPV1流行株与PPV1强毒株Kresse存在相似的毒力位点,且存在5处特有的突变,可能为高毒力毒株。研究结果有助于更好地了解中国猪群中PPV1~PPV7型分子流行病学并制定科学的防治措施。; 华涛常晨常晨张道华唐波; 关键词：猪细小病毒 PCR检测基因组毒力分析

猪细小病毒在ST细胞中增殖规律的动态分析被引量：2: 2015年; 将猪细小病毒接种于ST细胞,于不同时间点收获病毒测定其病毒滴度与病毒拷贝数,以此分析该病毒在ST细胞上的增殖规律。细胞于感染后48 h开始出现细胞病变,84 h细胞出现脱落和崩解。TCID50结果显示,病毒感染后18 h即能检出病毒滴度,随后逐渐升高至72 h达到峰值(107.2/m L),其后逐渐下降。通过SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法测定不同时间病毒体外感染细胞后的复制动态水平,病毒含量的增长于108 h达到峰值随后逐渐下降。通过对PPV在ST细胞中的体外复制动态分析结果表明感染后96~108 h为最佳收毒时间,这为利用细胞增殖病毒生产疫苗提供重要参考。; 唐波张道华张雪花常晨刘国阳王永帅唐应华华涛侯继波; 关键词：猪细小病毒 ST细胞病毒复制

表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体、重组菌及其应用: 本发明提供表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体、重组菌及其应用，属于生物技术领域。表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体，是将猪细小病毒VP2蛋白编码基因插入原核表达载体pEASY‑blunt E1后得到。本发明还提供表达猪细...; 华涛张道华唐波张雪花唐应华常晨刘国洋陆吉虎吴培培于漾侯继波; 文献传递

南京地区1株猪伪狂犬病毒的分离与鉴定被引量：5: 2016年; 于2013年从南京某猪场送检发病仔猪脏器中分离获得1株病毒。病样组织液上清经BHK细胞分离培养后,利用PCR和间接免疫荧光反应进行鉴定,PCR可以扩增出PRV gE基因的全长片段,且在间接免疫荧光检测中呈现阳性荧光反应。将命名为NJ株的分离病毒接种家兔,被接种的家兔很快出现瘙痒、死亡等伪狂犬病症状。与以往发表的伪狂犬病毒gE基因序列比对及进化树分析结果显示,分离株属于一个相对独立的分支。由中国兽药监察所提供的伪狂犬病阳性血清对分离株有一定的中和能力。根据实验结果推测,南京某猪场流行的伪狂犬病毒存在一定的抗原变异。; 常晨张道华唐波刘国阳华涛侯继波; 关键词：伪狂犬病病毒 GE基因

PCV2与PPV体外混合感染猪肺泡巨噬细胞对细胞因子的影响被引量：10: 2014年; 通过PCV2与PPV混合感染猪肺泡巨噬细胞,探讨PCV2与PPV体外混合感染的致病机制。体外分离猪肺泡巨噬细胞(PAMs),分为PCV2、PPV、PCV2/PPV混合感染组和对照组,采用实时荧光定量PCR技术检测PAMs中PCV2与PPV病毒拷贝数及细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-10的mRNA转录水平的变化。结果表明,PPV能在PAMs中增殖,而PCV2在肺泡巨噬细胞中增殖效率较低;PCV2能促进PPV增殖;PPV单独感染PAMs后能促进IFN-γ和TNF-α的表达;PCV2单独感染PAMs后能促进IFN-γ的表达,并在感染早期促进TNF-α的表达;PCV2与PPV混合感染后能显著抑制IFN-γ的表达,在感染早期对TNF-α的促进作用高于PCV2单独感染组,并能短暂的刺激IL-10的过量表达。说明PCV2与PPV混合感染存在协同致病作用,两种病毒共同刺激了TNF-α和IL-10的大量表达,抑制了IFN-γ的表达。; 王永帅唐波张雪花华涛常晨刘国洋侯继波张道华杨德吉; 关键词：猪细小病毒肺泡巨噬细胞细胞因子

猪伪狂犬病活疫苗冻干耐热保护剂、其制备方法及用途: 本发明提供了一种猪伪狂犬病活疫苗冻干耐热保护剂、及其制备方法和用途，该保护剂特征为无明胶、无蛋白。该保护剂包括蔗糖2％‑8％、异麦芽酮糖3%‑6%、D‑山梨醇1%‑5%、甘油1%‑5%、羟丙甲纤维素0.1%‑5%、蛋氨酸...; 赵艳红吕芳卢宇常晨左晓昕邓碧华张金秋

表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体、重组菌及其应用: 本发明提供表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体、重组菌及其应用，属于生物技术领域。表达猪细小病毒VP2蛋白的重组载体，是将猪细小病毒VP2蛋白编码基因插入原核表达载体pEASY-blunt？E1后得到。本发明还提供表达猪细...; 华涛张道华唐波张雪花唐应华常晨刘国洋陆吉虎吴培培于漾侯继波

猪伪狂犬病活疫苗冻干耐热保护剂、其制备方法及用途: 本发明提供了一种猪伪狂犬病活疫苗冻干耐热保护剂、及其制备方法和用途，该保护剂特征为无明胶、无蛋白。该保护剂包括蔗糖2％‑8％、异麦芽酮糖3%‑6%、D‑山梨醇1%‑5%、甘油1%‑5%、羟丙甲纤维素0.1%‑5%、蛋氨酸...; 赵艳红吕芳卢宇常晨左晓昕邓碧华张金秋; 文献传递

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