黄璋琼
- 作品数:62 被引量:37H指数:4
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划云南省应用基础研究计划面上项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 基于CRISPR/Cas9系统构建Uox基因敲除的高尿酸血症小鼠模型
- 2025年
- 目的 通过CRISPR/Cas9技术构建Uox基因敲除且能稳定遗传的小鼠品系,并评价其是否能够模拟高尿酸血症患者的疾病特点。方法 在Uox基因Exon 2~4的前后两侧设计双sgRNA,将基因敲除所需的sgRNA与Cas9 mRNA按照一定比例显微注射进小鼠的受精卵中,培养2~4 h后,将胚胎移植至代孕母鼠体内并最终获得F0代小鼠。对F0代小鼠进行PCR鉴定与测序分析,筛选适合的Uox基因阳性敲除小鼠与野生型(wide type, WT)小鼠合笼获得F1代,再挑选F1代中杂合子(基因型为Uox^(+/-))雌鼠与雄鼠合笼得到纯合的F2代小鼠(基因型为Uox^(-/-))。最后检测Uox^(-/-)小鼠与WT小鼠血清尿酸、尿液尿酸,血清中肌酐、尿素、丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶的含量并进行对比,通过苏木素-伊红(HE)染色结合Masson染色观察肾和肝组织的病理变化。结果 与WT小鼠相比,Uox^(-/-)小鼠血清尿酸(雄鼠:(478.4±114.6)μmol/L,P<0.001;雌鼠:(507.7±129.6)μmol/L,P<0.001)、尿液尿酸(雄鼠:(4116.8±1928.1)μmol/L,P<0.001;雌鼠:(2998.0±547.7)μmol/L,P<0.01)、血清中肌酐((91.8±55.6)μmol/L,P<0.001)、尿素((28.6±13.9) mmol/L,P<0.05)、丙氨酸氨基转移酶((53.3±23.3) U/L,P<0.01)及门冬氨酸氨基转移酶((203.3±70.3) U/L,P<0.001)水平均显著升高。组织病理学的结果显示,Uox^(-/-)小鼠的肝中可见中量肝细胞变性,肾中可见中重度的肾小管囊性扩张、变性和纤维化,肾小球肥大增生,小血管扩张充血,间质单核及淋巴细胞浸润。结论 通过CRISPR/Cas9技术成功构建了Uox基因Exon 2敲除的小鼠纯合品系,可以作为高尿酸领域相关研究的动物模型。
- 张艺薇龙维虎唐东红范胜涛王鹏王陈芸李哲丽黄璋琼叶尤松
- 关键词:高尿酸血症动物模型基因敲除尿酸氧化酶
- 野生滇西亚种树鼩体内外寄生虫感染及其致病性的分析被引量:4
- 2014年
- 目的调查分析野生滇西亚种树鼩体内外寄生虫感染种类及特征,分析其可能对动物的致病性,为人工饲养树鼩的质量控制和保护树鼩群体提供科学依据。方法随机选取200只野生滇西亚种树鼩,分别用活体漂浮法和直接拔毛法制片,置于体视镜和显微镜下鉴定体外寄生虫种类;体内寄生虫分别采用粪便漂浮法和粪便沉淀法进行检测,并在显微镜下鉴定。结果野生滇西亚种树鼩体外寄生虫感染率分别为虱20.5%、蚤5.5%、螨3.0%、颗粒硬蜱1.0%、黄蛛甲1%、圆胸皮蠹1%、水蛭1%、蛛甲0.5%;体内寄生虫感染率分别为线虫14%、线虫卵33%、绦虫9%、绦虫卵20%、变形虫2%。结论野生滇西亚种树鼩体内外寄生虫的自然感染种类繁多,对树鼩群体的影响不可低估,应该引起重视。
- 黄璋琼王文广李晓飞黄晓燕孙晓梅代解杰
- 关键词:树鼩体外寄生虫体内寄生虫
- 野生成年树鼩主要脏器重量及脏器系数的测定分析被引量:7
- 2011年
- 目的对野生成年树鼩的体重和主要脏器重量进行测定,计算其脏器系数。方法测定60只野生成年树鼩体重及11个主要脏器重量,并计算其脏器系数。进行脏器重量、脏器系数的性别间比较分析及Kendall和谐系数分析。结果性别间比较心、肺重量差异极显著(P<0.01),脑、肾上腺、胰腺重量之间差异显著(P<0.05);肾上腺、胰腺系数差异有极显著性(P<0.01),心、肺、肾系数之间差异均达到了显著水平(P<0.05)。Kendall和谐系数(W)分析表明,动物与其个体各主要器官整体发育协调性较好。结论野生成年树鼩心重量、肺重量、脑重量、肾上腺重量、胰腺重量、肾上腺系数、胰腺系数、心系数、肺系数、肾系数性别间存在差异。
- 叶尤松罕园园黄璋琼陆彩霞江勤芳孙晓梅代解杰
- 关键词:脏器重量脏器系数
- 一种hFGF21基因敲除人肝细胞株的构建方法
- 本发明公开了一种hFGF21基因敲除人肝细胞株的构建方法,该方法通过设计hFGF21靶位点引物并合成sgRNA寡核苷酸链序列,然后构建重组慢病毒质粒,获得重组慢病毒转染细胞,稳定敲除hFGF21基因,获得hFGF21基因...
- 张莹鲁帅尧胡婧雯马开利江勤芳高家红黄璋琼吴正存李云李聪杜廷福
- 文献传递
- 人工饲养树鼩和猕猴的部分凝血因子凝集时间的测定及分析
- 2011年
- 目的目前有关人工饲养树鼩与猕猴部分凝血因子凝集时间的资料甚少,拟初步建立这两种动物部分凝血因子凝集时间的参考值范围。方法采用全自动血凝仪测定树鼩、猕猴的血浆凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)。结果树鼩的TT、PT、Fib和APTT值分别为19.27、17.34、30.51和27.88 s。猕猴的TT、PT、Fib和APTT值分别为20.81、9.82、18.73和33.56 s。人工饲养树鼩与猕猴的PT值、Fib值存在显著性差异(P<0.01),APTT值、TT值存在差异(P<0.05)。结论人工饲养树鼩和猕猴部分凝血因子的凝集时间存在一定差异,同一物种雌雄个体间部分凝血因子的凝集时间没有明显差异。
- 黄璋琼代解杰孙晓梅李辛斌高家红
- 关键词:树鼩猕猴凝血酶时间活化部分凝血活酶时间凝血酶原时间
- 一种用于评价食蟹猴脂肪组织中FABP4基因mRNA表达的qPCR检测方法
- 本发明涉及基因检测技术领域,特别是涉及一种用于评价食蟹猴脂肪组织中FABP4基因mRNA表达的qPCR检测方法。本发明提供的引物组可实现食蟹猴FABP4基因及内参基因GAPDH的特异性扩增,对样本中的非目的基因没有扩增信...
- 王陈芸唐东红叶尤松龙维虎李哲丽李咏洁张桃苹范胜涛黄璋琼江勤芳杨万静杨汝佳
- 非人灵长类动物的精子冷冻保存及复苏方法
- 本发明公开一种非人灵长类动物的精子冷冻保存及复苏方法,将精液在常温下液化30分钟,用HTF培养液将猴精液稀释10倍,根据精液的体积,添加甘油,使甘油的体积终浓度达10%,分装于1.5mL冻存管中,4℃下放置30分钟,再转...
- 马开利黄璋琼鲁帅尧李云江勤芳高家红
- 笼养猕猴食铁丝造成死亡的病例报告
- 2012年
- 铁是人和动物体内红细胞合成血红素必不可少的物质,也是许多酶的辅酶,与多种物质的代谢有密切的关系。但是铁的过度积累也可造成机体实质性脏器的损伤,继而影响这些脏器的生理功能[1]。一般动物的铁中毒(iron poisoning)多发生在补充铁剂过量的畜禽中,比如猪、狗和禽类[2]。临床上初期以出血性胃肠炎为特征,伴有腹泻和呕吐,后期以出现休克、惊厥及急性肝坏死为特征。
- 黄璋琼李贵胡正飞叶尤松吕龙宝
- 关键词:病例报告猕猴笼养出血性胃肠炎动物体内细胞合成
- 一种用于食蟹猴精液质量评价的Sirt1 mRNA表达的qPCR检测方法
- 本发明提供了一种用于食蟹猴精液质量评价的Sirt1mRNA表达的qPCR检测方法,属于检测方法,具体方法为以食蟹猴新鲜精液提取的总RNA逆转录合成得到的cDNA为模板,利用PCR引物组合进行实时荧光定量PCR扩增,获得S...
- 王陈芸唐东红叶尤松 龙维虎李哲丽 李咏洁 张桃苹范胜涛黄璋琼江勤芳 杨万静 杨汝佳 高羽
- RT-qPCR检测猕猴肝脏嘌呤核苷磷酸酶PNP基因转录水平的引物、试剂盒及方法
- 本发明涉及RT‑qPCR检测猕猴肝脏嘌呤核苷磷酸酶PNP基因转录水平的引物、试剂盒及方法,属于分子生物技术领域。本发明方法以猕猴新鲜肝脏组织提取的总RNA逆转录合成得到的cDNA为模板,利用PCR引物组合进行实时荧光定量...
- 唐东红王陈芸叶尤松李哲丽马开利鲁帅尧易红昆黄璋琼
- 文献传递