王艳霞
- 作品数：12 被引量：31H指数：3
- 供职机构：内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 几种乳酸菌S-层蛋白的普查以及slp基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2010年
- 从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-layers pro-tein,SLP)的普查和slp基因的检测。结果表明:在各种乳酸菌中,经SDS-PAGE电泳方法检测,只有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和其标准菌株的样品中出现膜外蛋白的可疑条带,大小为44～66ku之间,与文献报道的slp基因表达产物大小范围是一致;经PCR方法检测,只有嗜酸乳杆菌和其标准菌株L.acidophilus ATCC4356中扩增出slp基因可疑条带,其大小约为1 300 bp。并对嗜酸乳杆菌slp基因进行克隆、基因序列测序和分析。
- 双杰包秋华永胜王艳霞张和平格日勒图
- 关键词：嗜酸乳杆菌S-层蛋白克隆与序列分析
- 牛微小隐孢子虫表面抗原CP15基因原核表达及其表达产物的鉴定被引量：3
- 2012年
- 试验旨在构建微小隐孢子虫表面抗原CP15基因原核表达载体并获得重组CP15蛋白。试验以已知重组质粒pMD-CP15为模板,PCR方法扩增出CP15基因片段,并亚克隆到pGEX4T-3,构建了在E.coli BL21中GST融合表达载体pGEX-CP15;经1mmol/L IPTG进行诱导表达获得目的蛋白,其大小采用SDS-PAGE电泳和Western blotting进行鉴定。结果表明,扩增出约390bp的微小隐孢子虫表面抗原CP15基因片段并成功构建pGEX-CP15质粒,表达出分子质量为42ku的融合蛋白,与推导的理论值相符。Western blotting显示该蛋白能被GST血清识别。牛微小隐孢子虫表面抗原CP15基因在大肠杆菌中得到了高效表达。
- 满达兰丽王艳霞王敏格日勒图
- 关键词：原核表达
- Lactobacillus fermentum MG 2CRS突变体的构建及其益生作用变化
- 3制二者的生长：耐酸试验结果显示：在pH 4。5的条件下，Lf-Mutat 和Lf-Widy tipe均生长良好;在pH 3．0的条件下，Lf-Mutant生长受抑制，而Lf-Widy tipe则可良好生长;耐胆盐试验结...
- 王艳霞
- 关键词：发酵乳杆菌
- 几种食用乳酸菌内源性质粒DNA的普查、消除及其稳定性试验被引量：2
- 2008年
- 以内蒙古和青海等地区牛乳中分离的11种野生乳酸菌为材料,分别应用核酸电泳技术、药物敏感试验和SDS-变温质粒DNA消除等方法,进行了内源性质粒DNA的普查、消除及其稳定性试验。结果表明:11种野生乳酸菌均被检测出不同大小的质粒DNA的可疑条带,可分为大于23 kb和小于23 kb两个型;经SDS-变温方法消除质粒DNA后,除3种乳酸菌不宜生长而被淘汰以外,在剩余8种乳酸菌中,小于23 kb型的条带全部被消除,个别大于23 kb型的可疑条带也能被消除,与药物敏感补充试验所得到的结果基本相符;已被消除质粒DNA的8种乳酸菌经过转接培养20代,显示出良好的遗传稳定性。本研究为筛选和建立新型基因工程受体菌奠定了基础。
- 格日勒图张延超王艳霞张和平
- 关键词：乳酸菌稳定性
- 微小隐孢子虫P23抗原在重组干酪乳杆菌中的分泌表达及其免疫原性被引量：1
- 2012年
- 本实验以微小隐孢子虫 Cryptosporidium parvum 子孢子抗原P23基因和信号肽基因Usp45为材料,构建干酪乳杆菌 Lactobacillus casei 中分泌表达P23蛋白的重组载体pMG-Usp45-P23.在培养物上清和细菌裂解组分中,分别以SDS-PAGE、Western blotting、IFAT和ELISA等不同方法检测P23蛋白的分泌和表达情况,并用已获得的P23蛋白分泌产物体外刺激Wistar大鼠淋巴细胞,评价其淋巴细胞转化活性.结果表明,分别在细菌培养物上清和破碎菌体组分中检测到大小约为20 kDa（不含信号肽）和23 kDa （含信号肽）的P23蛋白分泌和表达产物.并且该P23蛋白分泌产物与ConA相当,具有显著的淋巴细胞转化活性.本实验为进一步研制动物微小隐孢子虫 C.parvum 活菌疫苗载体的构建奠定了基础.
- 石泉玉斯日古楞兰丽王艳霞贾洪林玄学南张和平格日勒图
- 关键词：干酪乳杆菌微小隐孢子虫分泌表达
- 应用表达微小隐孢子虫P23的重组干酪乳杆菌建立微小隐孢子虫IFAT诊断方法
- 2010年
- 本试验旨在建立IFAT和间接ELISA方法作为微小隐孢子虫病诊断方法。应用DNA重组技术,构建原核表达载体pGEX-P23,经IPTG诱导表达出GST-P23融合蛋白,并进行纯化,将该重组融合蛋白作为包被抗原,建立ELISA诊断方法;同样构建重组载体pMG-P23,用电转化方法将其转入干酪乳杆菌中,称为重组活干酪乳杆菌(含pMG-P23),以此为已知抗原,建立IFAT诊断方法。应用ELISA和IFAT方法检测来自内蒙古地区的508份牛血清、187份绵羊血清和197份山羊血清:其中ELISA方法在各种动物血清中阳性率依次分别为0.59%、5.88%和4.57%,而IFAT方法则为0.19%、5.88%和4.57%。2种检测方法阳性符合率在牛血清样品中为33.33%,在绵羊和山羊中则均为100%。试验结果表明,重组抗原P23具有良好的反应原性,2种诊断方法的结果基本吻合,显示出良好的一致性和敏感性,可在微小隐孢子虫病的诊断实践中推广应用。
- 格日勒图石泉王艳霞兰丽满达张和平
- 关键词：微小隐孢子虫ELISAIFAT
- 一种盆栽水分监测装置
- 本实用新型涉及盆栽水分监测技术领域，尤其涉及一种盆栽水分监测装置，其技术方案包括：育苗箱，所述育苗箱正面设有控制面板，所述控制面板后端设有监测探头，所述育苗箱内壁后端固定安装有放置架，所述放置架内活动放置有育苗杯，所述监...
- 石慧敏侯建华邬阳李丹丹伊六喜王艳霞周佳岭
- 三种提取乳酸菌中内源性质粒DNA方法的比较被引量：2
- 2008年
- 采用3种不同抽提质粒DNA的方法普查了6株不同乳酸菌的内源性质粒DNA,并对3种不同方法进行比较。在相同条件下,琼脂糖凝胶电泳检测的结果显示:效果最佳者为改进的Anderson-Mckay方法,其次为液氮反复冻融方法,最差者为改进的碱裂解方法。为抽提革兰阳性细菌乳酸菌类的内源性质粒DNA提供了行之有效的方法。
- 王艳霞石泉包秋华张和平格日勒图
- 关键词：乳酸菌抽提方法
- 短小乳杆菌内蒙古分离株S-层蛋白的普查、鉴定和基因分析
- 2012年
- S-层蛋白(S-layers protein)是位于某些细菌表面的高度有序的具有超微结构的一种外膜蛋白。本试验以蒙古族传统乳制品中分离的短小乳杆菌(Lactobacillus brevis)为材料,应用SDS-PAGE技术对若干乳杆菌进行S-层蛋白的普查,并应用PCR方法克隆出L.brevis的slp基因,对该slp基因进行测序及序列分析。试验结果表明,SDS-PAGE电泳结果显示L.brevis样品在44～55 ku之间出现目的条带,与文献报道的S-层蛋白大小范围一致;PCR方法正确扩增出大小约为1300 bp的slp基因,经DNAStar软件遗传分析发现该基因与鸡乳酸杆菌株(GenBank登录号:AY597266.1)的亲缘关系和遗传距离最近,与其他种类乳酸菌遗传距离也非常相近;经Genetyx生物软件推导出的S-层蛋白大小理论值约为47 ku,具有显著的外膜蛋白的特性。本试验为后续遗传改造等研究工作奠定基础。
- 兰丽魏建民王艳霞王敏满达格日勒图
- 关键词：S-层蛋白克隆与序列分析
- 不同生物反应堆对设施黄瓜根际土壤细菌群落结构多样性的影响
- 2024年
- 研究不同生物反应堆处理对设施黄瓜根际土壤细菌群落结构及多样性的影响,旨在为黄瓜根际土壤改良和设施土壤可持续利用提供理论依据和现实基础。以16S rRNA基因V3-V4区为基础,设置原始温室土壤(CK),未经处理的黄瓜根际土壤100(CK1),200 d(CK2),玉米秸秆生物反应堆处理100(S1),200 d(S2)的根际土壤,羊粪生物反应堆处理100(M1),200 d(M2)的根际土壤7个处理,使用Illumina Miseq高通量测序技术对不同生物反应堆处理下的设施黄瓜进行根际土壤细菌群落多样性、结构、理化性质分析。结果表明,土壤样品经测序后共得到6344个OTUs,主要隶属于39门315目980属;M2处理可提高黄瓜根际土壤细菌丰富度,并显著增加细菌群落多样性。在门水平上,玉米秸秆生物反应堆处理和羊粪生物反应堆处理土壤细菌门水平优势种群结构相似,其中放线菌门和变形菌门是优势菌门;在属水平上,norank_f_JG30-KF-CM、节杆菌属、norank_f_norank_o_Gaiellales、norank_f_67-14、芽球菌属、Gaiella、火山岩海球菌属(Marmoricola)在不同处理之间有显著差异;从细菌群落丰度组成情况来看,M2处理和S2处理在一定程度上提高了黄瓜根际部分有益细菌类群相对丰度;RDA分析表明,土壤细菌群落受土壤环境因子的影响显著,铵态氮含量(P=0.015)、全钾含量(P=0.002)、速效钾含量(P=0.005)对细菌群落影响显著。因此,M2处理可提高设施黄瓜根际土壤细菌丰富度、增加细菌群落多样性、改变细菌群落结构,有利于设施黄瓜根际土壤的改良。
- 王嘉王艳霞潘璐宋阳李晓静
- 关键词：设施黄瓜根际土壤生物反应堆细菌群落高通量测序
