目的了解宁夏2020年流感病原学检测情况,分析H3N2流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因特征及对奥斯他韦和扎那米韦的药物敏感性。方法采集2020年宁夏9家国家级流感监测哨点医院流感样病例标本,采用real time RT-PCR方法进行核酸检测,阳性标本用狗肾细胞(MDCK)进行病毒分离;分离的H3N2流感毒株进行NA基因序列测定,利用生物信息软件对测序结果进行比对,分析变异和耐药位点;通过神经氨酸酶抑制(NAI)实验,分析H3N2流感病毒耐药情况。结果2020年宁夏采集咽拭子标本共6479份,核酸检测阳性数为273份,阳性率为4.21%,其中H3N2流感阳性数为178份,占总阳性数的65.20%,分离H3N2流感毒株26株。H3N2流感毒株NA蛋白酶活性中心及周围相关位点未发生变异;与疫苗株A/Kansas/14/2017(H3N2)比较,A/Ningxia-Yuanzhou/1116/2020(H3N2)和A/Ningxia-Yuanzhou/133/2020(H3N2)毒株发生T329N、N339D变异,增加1个潜在糖基化位点NDS329~331;其余24株NA蛋白抗原决定簇位点发生T329S变异,潜在糖基化位点与疫苗株一致共有8个;二硫键未发生变异。26株H3N2流感毒株间的NA基因核苷酸同源性为98.7%~100%,与疫苗株A/Kansas/14/2017(H3N2)的核苷酸同源性为98.1%~98.9%,宁夏毒株属3C.2a.1分支。26株H3N2流感毒株NA蛋白耐药位点未发生变异。26株对奥斯他韦敏的IC50值均<13.05;对扎那米韦的IC50值均<2.488。结论宁夏2020年流感优势毒株为H3N2流感毒株。NA蛋白序列发生了不同程度的变异。宁夏H3N2流感病毒对奥斯他韦和扎那米韦均敏感,可以继续使用此类药物进行H3N2流感病毒感染患者的临床治疗。
目的了解宁夏2018-2019流感监测年度流感病毒病原学检测情况,分析甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因特征。方法采用real time RT-PCR方法对流感监测哨点医院采集的流感样病例(ILI)标本进行核酸检测;对阳性标本进行毒株分离;提取甲型H1N1毒株的RNA,采用RT-PCR方法扩增HA片段并测序,利用生物信息软件对测序结果进行比对分析。结果宁夏流感网络实验室检测咽拭子标本共5 214份,核酸检测阳性数为760份,其中甲型H1N1阳性数为485份,占总阳性数的63.82%,分离出甲型H1N1毒株161株。宁夏分离毒株与疫苗株A/Califaoria/07/2009不在同一进化分支,同源性为92.6%~96.3%;与疫苗株A/Michigan/45/2015(H1N1)为同一进化分支,同源性为96.6%~98.1%。与疫苗株A/Califaoria/07/2009比较,抗原位点、受体结合位点及其他位点均有变异,除毒株A/Ningxia_Xixia/SWL1176/2019(H1N1)第222位氨基酸发生D222G变异外,其他甲型H1N1流感毒株均未发生D222G变异。所有毒株增加糖基化位点162NQT,个别毒株糖基化位点增加2~3个。结论宁夏2018-2019年度流感优势毒株为甲型H1N1毒株。序列分析表明甲型H1N1病毒发生了不同程度的变异,在抗原特异性、毒力和感染性上有可能已经发生变化,需要及时更换疫苗株成分。
