朱晓美
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学药学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人表皮生长因子的表达和兔抗人羧酸酯酶1多克隆抗体的制备
- 目的：人表皮生长因子(hEGF)的高效表达和兔抗人羧酸酯酶1(CES1)多克隆抗体(pAb)的制备与鉴定。
方法：将重组质粒pGEX-4T-1-hEGF、pGEX-4T-1-CES1和pET-32a-CES1转化入...
- 朱晓美
- 关键词：人表皮生长因子原核表达生物活性多克隆抗体
- 重组人表皮生长因子的构建与表达被引量：3
- 2011年
- 目的应用原核表达系统研究提高重组表皮生长因子(rhEGF)产量的方法。方法用RT-PCR方法克隆hEGF基因并插入表达载体pGEX-4T-1,获得重组的表达质粒pGEX-4T-1-hEGF转化大肠杆菌BL21并筛选得到工程菌株,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导目的蛋白表达,亲和层析纯化rhEGF,MTT法测定活性。结果成功扩增获得hEGF基因,部分表达产物为可溶性的、部分形成包涵体。菌体裂解上清液经亲和层析纯化后纯度达98%,复性后的rhEGF具有促细胞生长活性。结论成功构建并原核表达了重组人表皮生长因子基因,其表达产物具有很好的促细胞增殖活性。
- 李姗姗朱晓美鲍岩岩朱大岭
- 关键词：人表皮生长因子原核表达生物活性
- 兔抗人羧酸酯酶1多克隆抗体的制备与鉴定
- 2009年
- 目的:制备兔抗人羧酸酯酶1(CES1)多克隆抗体(pAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CES1(即CES1-GST)和pET-32a-CES1(即CES1-His)。CES1-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb,辛酸-硫酸铵法纯化抗体,采用Western blot和免疫组化鉴定抗体的特异性。结果:CES1-GST和CES1-His融合蛋白均在大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。兔抗人CES1pAb效价为1∶64000。Western blot鉴定表明,该抗体可识别重组人CES1蛋白,也可特异地识别人肝微粒体中的CES1亚基。免疫组织化学鉴定显示该抗体可特异性识别正常肝组织中的CES1蛋白。结论:成功地制备了兔抗人CES1pAb,该抗体可应用于ELISA、Western blot、免疫组化等实验,为进一步研究CES1的功能提供了特异性检测工具。
- 朱晓美李淑珍吴春铃包红霞朱大岭唐晓波
- 关键词：重组蛋白多克隆抗体
