孙凤祥
- 作品数：27 被引量：89H指数：5
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省高等学校科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程化学工程更多>>
- 猪肺血管紧张素转换酶的制备被引量：15
- 2002年
- 目的利用猪肺制备血管紧张素转换酶 (ACE)。方法将新鲜猪肺匀浆 ,6 0 0 0×g离心 30min后 ,经 1 .6～ 2 .6mol/L (NH4 ) 2 SO4 分级沉淀 ,SephadexG 2 0 0 ,QHyperD离子交换色谱 ,得到经SDS PAGE显示一条带的ACE纯品。结果猪肺 30 0g可制备出ACE 1 1 .2 5mg,活力回收率为 2 0 .70 % ,比活力为 1 4 80 .0u/mg,较组织匀浆上清提纯提高 42 8.99倍。结论此法结果较理想 。
- 孙凤祥曲梅花高佩林任维栋
- 关键词：血管紧张素转换酶纯化
- 甲壳糖固定血管紧张素转换酶的制备及其性质被引量：1
- 2004年
- 目的 将血管紧张素转换酶 (ACE)固定化并测定其动力学性质。方法 以甲壳糖为载体 ,碳二亚胺 (EDC)为交联剂 ,与分离纯化的ACE混合 ,使ACE固定化 ;并以马尿酰甘氨酰甘氨酸 (HGG)为底物 ,分别测定了其游离酶和固定化酶的动力学性质。结果 固定化酶活力 110u g湿重 ,固定化率为 2 2 % ,与游离酶比较 ,固定化酶稳定且具良好的耐热性 ,在 5 0～ 80℃固定化酶较游离酶稳定。在pH7.1的底物缓冲体系中 ,37℃ ,游离酶Km =0 .0 2 6mol L ;在间歇振摇下固定化酶的表观Km =0 .0 4 0mol L。游离酶最适pH为 8.0 ,固定化酶最适pH为 9.0。结论 用甲壳糖固定ACE方法简便可行 ,且固定后的甲壳糖性能稳定 。
- 孙凤祥刘长江王守训任维栋邵建新
- 关键词：血管紧张素转换酶固定化ACE动力学性质
- 丙烯酰胺对小鼠抗氧化功能危害的研究被引量：2
- 2001年
- 崔群范志涛孙凤祥刘长江李慧
- 关键词：丙烯酰胺脂质过氧化小鼠抗氧化功能
- 蛋白环形序列重组技术在脂肪酶分子改造中的应用
- 2012年
- 脂肪酶的底物特异性与酶的催化效率是限制其规模化应用的瓶颈,传统的分子改造技术在对脂肪酶的空间结构改变及大分子底物的催化效率提升方面效果并不明显。在介绍现有的脂肪酶改造技术的基础上,重点介绍了新型蛋白分子改造手段-蛋白环形序列重组(CP)技术的原理及在脂肪酶基因工程改造方面的应用。
- 付新华孙凤祥
- 关键词：脂肪酶分子改造基因工程
- 香烟提取物的致突变性研究
- 2001年
- [目的 ]实验观察香烟提取物 (TPM )的致突变性。 [方法 ]取香烟TPM样品 11个 ,按不同剂量 ( 10 0、5 0 0、10 0 0 μg/皿 ) ,采用平板掺入法进行Ames试验检测TPM的致突变性 ;按 30、10 0、30 0mg/kg剂量进行小鼠骨髓微核试验。 [结果 ]Ames试验样品在不经活化时 ( -S9) 5 0 0、10 0 0 μg /皿 ,TA98、TA10 0 、TA97、TA10 2 Rt/Rc值 >2有剂量 反应关系 (r =0 93,P <0 0 1) ;样品经活化后 ( +S9) 5 0 0、10 0 0 μg/皿 ,TA98、TA10 0 、TA97、TA10 2 Rt/Rc值均 >2。 2 5个剂量组微核阳性率与对照组比较差异有统计学意义 (P <0 0 5或P <0 0 1)。 [结论
- 崔群韩连堂范志涛王志萍孙凤祥李锋杰邱玉刚
- 关键词：香烟提取物AMES试验微核试验致突变性TPM
- hTERT和survivin双靶点RNAi表达载体的构建及对人结肠癌SW480细胞的抑制作用被引量：1
- 2013年
- 目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)和生存素(survivin)基因表达的RNA共干扰载体,并检测其对人结肠癌SW480细胞中hTERT基因和survivin基因的干扰作用。方法根据Genbank提供的hTERT和survivin cDNA序列,设计、筛选出高效、特异性强的干扰序列,构建特异性干扰hTERT基因和survivin基因的重组体pGenesil-1.1-survivin、pGenesil-1.2-hTERT,酶切、测序鉴定正确后,两个重组体均用HindⅢ和BamHⅠ双酶切,将pGenesil-1.1-survivin回收大片段,pGenesil-1.2-hTERT回收小片段,将回收大、小片段用T4 DNA连接酶定向连接,即构建成重组体pGenesil1.1-survivin-hTERT。将3个重组体分别转染SW480细胞,RT-PCR检测细胞中hTERT和survivin基因表达水平,MTT检测对SW480细胞增殖的影响。结果构建的各质粒经限制性酶切及DNA测序均证明其质粒构建正确,RT-PCR检测hTERT和survivin基因表达水平明显降低(P<0.05),各干扰质粒重组体对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05)。结论靶向survivin和hTERT基因的双干扰载体构建成功,为后续的结肠癌基因治疗研究奠定理论基础。
- 王平肖琳董俊红孙凤祥蒋吉英王守训
- 关键词：SURVIVINHTERT
- 固定无花果蛋白酶制备可溶性肽的研究
- 1993年
- 将 Sephadex G-200与β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)首先醚化制备对氨基苯砜乙基交联葡聚糖(ABSE-Sephadex G-200),然后经重氮化固定无花果蛋白酶。固定化酶的活力回收达69%。苯甲酰-DL-精氨酰-β-蓁胺(BANA)对该酶固定化过程中的活性变化有保护作用。天然酶与固定化酶都具有良好的耐热性,在59～60℃,80min,活性均无明显下降;在69～70℃,80min 固定化酶较天然酶更稳定。用 BANA 为底物,在半胱氨酸存在下,测定了两种形式酶的动力学性质。在 pH7.7的磷酸盐缓冲系统中,37℃天然无花果蛋白酶的 Km=0.32m-mol/L;在间歇振摇下固定化酶的表观 Km′=1.02mmol/L。最适 pH 无明显改变,均为7.7。
- 任维栋耿秀芳孙凤祥
- 关键词：蛋白酶动力学
- 银杏黄酮磷脂复合物对过氧化损伤血管内皮细胞的保护作用研究
- 动脉粥样硬化(AS)及其并发症严重威胁中老年人的健康,而血管内皮细胞(EC)损伤是AS发生的早期事件。因此,寻求保护EC免受损伤的药物并探讨其作用机制对于防治AS及其并发症有重要意义。制备银杏黄酮磷脂复合物,测定其物理化...
- 王守训史立宏李桂芝高尔孙凤祥
- 关键词：银杏黄酮磷脂复合物
- 文献传递
- 溴甲烷对小鼠非特异性抵抗力和免疫功能的影响
- 1999年
- 实验观察澳甲烷(CH_3Br)染毒小鼠非特异性抵抗力和免疫功能变化,实验小鼠分别用CH_3Br(385±23mg/m^3、770±32mg/m^3)染毒2h,3天后复染1次,染毒后1周分别测定非特异性抵抗力和免疫功能改变。染毒小鼠耐疲劳性,常压耐缺氧、耐高温能力和血中胶体炭粒清除速度与对照组比较均明显下降。CH_3Br有降低小鼠非特异性抵抗力和网状内皮系统吞噬功能的作用。
- 范志涛崔群孙凤祥李慧邵建新
- 关键词：免疫功能小鼠神经毒作用
- 三乙醇胺对碱性磷酸酶活性的影响
- 2002年
- 为了测定三乙醇胺对碱性磷酸酶活性的影响 ,采用经典酶学方法观察了三乙醇胺对溶液 AL P的抑制类型 ,并将 ALP用 Sepharose4B-CNBr固定化 ,再测定其抑制作用。结果显示 ,三乙醇胺对溶液 AL P的抑制作用属混合型抑制作用 ,其 Ki=0 .0 2 4mmol/l;Ki =0 .0 0 6 5 mmol/l ;对固定化酶仍起抑制作用 ,其表观 Kmapp为 3.13mmol/l,高于无抑制剂的 Kmapp2 .6
- 孙凤祥曲梅花高佩琳严庆涛任维栋
- 关键词：三乙醇胺碱性磷酸酶ALP
