何晓波 作品数:15 被引量:11 H指数:2 供职机构: 青岛农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部科学技术研究重点项目 转基因生物新品种培育专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
家猪NCOA1基因的检测 本研究以81头家猪为研究对象,采取常规酚-氯仿抽提法从耳组织提取基因组DNA.然后以基因组DNA为模板进行PCR扩增获得NCOA1基因的目的片段(大小440bp).利用限制性内切酶Rsa Ⅰ对PCR产物进行酶切.琼脂糖电... 侯永刚 赵雯 何晓波 孙金海关键词:内切酶 基因检测 基因型频率 等位基因 家猪 文献传递 13/17罗伯逊易位猪POU1F1基因多态性与经济性状的相关分析 被引量:2 2008年 利用外周血淋巴细胞培养制备染色体标本,对13/17罗伯逊易位猪的3种杂交组合的394头后代猪进行分群;应用PCR-RFLP技术在POU1 F1基因的扩增片段(1746 bp)中检测到1个RsaⅠ限制性内切酶的多态酶切位点A(3种基因型);应用PCR-SSCP技术检测1个POU1 F1基因第5内含子上的突变E(2种基因型),同时结合生长和胴体品质测定记录研究基因型对生产性状的遗传效应。结果表明,位点A的基因型对生长有显著影响(P<0.05),位点E基因型对生长和眼肌面积有显著影响(P<0.05)。研究结果初步揭示POU1 F1多态性与生长、眼肌面积等存在相关,推测POU1 F1多态性可作为罗伯逊易位杂合优势遗传机制的一种分子水平上的解释。 姜丽花 赵雯 何晓波 孙金海 张廷荣 杜方磊关键词:罗伯逊易位 POU1F1基因 核型 Polymorphism Analysis of NCOA1 Gene in Pigs by PCR-RFLP 2010年 [Objective] The research aimed to study the polymorphism of NCOA1 gene in pigs by PCR-RFLP.[Method] Using 81 Landrace pigs from Liuhe pig breeding farm as research objects,the genome DNA was extracted from ear tissue of pigs by conventional Phenol-chloroform extraction method.The genomic DNA was used as template to make PCR amplification and a 440 bp target fragment was obtained.PCR amplification products were digested by restriction nuclease Rsa I.The agarose gel electrophoresis detection was made.And the gene frequency and the genotype frequency were calculated.[Result] The agarose gel electrophoresis detection showed that the enzyme digestion products had three genotypes of AA (440 bp),AB (440 bp,282 bp,158 bp) and BB (282 bp,158 bp):The genotype frequencies of AA,AB and BB were 0.54,0.43 and 0.03,respectively:The frequencies of allele A and B were 0.76 and 0.24,respectively.[Conclusion] In the studied pig herd,A is the dominant allele and the genotype frequency of AA is higher. 侯永刚 闫守庆 何晓波 柏蒙蒙 孙泰雷 吴明明 孙金海关键词:PIGS PCR-RFLP POLYMORPHISM 13/17罗伯逊易位猪POU1F1基因多态性 被引量:2 2008年 采用外周血淋巴细胞培养制备染色体标本,对13/17罗伯逊易位猪的3种杂交组合的394头后代进行核型分析,出现3种核型猪:13/17易位纯合子猪[2n=36,XY或XX,rob(13;17)]、13/17易位杂合子猪[2n=37,XY或XX,rob(13;17)]和正常核型猪[2n=38,XY或XX]。应用PCR-RFLP技术在POU1F1基因的1746bp扩增片段中检测到1个RsaⅠ限制性内切酶的多态位点。应用PCR-SSCP技术检测POU1F1基因第4外显子,在3种杂交后代群中均未检测到突变。遗传多态性分析结果表明:RsaⅠ酶切多态位点的突变在3种杂交后代群中A等位基因和AA基因型频率占优势,在3种核型群体中也是A等位基因和AA基因型频率占优势,其中AB基因型频率在易位杂合型群体中较高。各杂交后代群均未达到Hardy-Weinberg平衡,不同核型群亦处于非平衡状态。13/17易位杂合子猪×13/17易位杂合子猪和13/17易位杂合子猪×约克两杂交后代群的PIC表现为中度多态,而13/17易位杂合子猪×皮杜杂交后代群表现为低度多态;易位杂合型群体表现为中度多态,正常核型和易位纯合型群体表现低度多态性。 姜丽花 赵雯 何晓波 张廷荣 孙金海关键词:罗伯逊易位 POU1F1基因 核型 多态性 家猪13/17罗伯逊易位染色体着丝粒DNA的FISH检测 2009年 根据已报道的家猪着丝粒卫星DNA序列设计引物,对家猪基因组DNA进行PCR扩增,得到AC2卫星DNA序列。用PCR法将D ig-dUTP插入目的片段中得到标记DNA,然后利用荧光原位杂交方法检测13/17易位染色体。研究结果显示杂交信号位于所有端着丝粒染色体和13/17易位染色体的着丝粒区域,表明13号染色体和17号染色体虽然融合为一条亚中着丝粒染色体,但仍含有端着丝粒AC2卫星DNA,13/17易位染色体的AC2卫星DNA未发生缺失。 何晓波 侯永刚 孙泰雷 柏蒙蒙 孙金海关键词:家猪 罗伯逊易位 荧光原位杂交 猪NCOA1基因PCR-RFLP多态性分析 被引量:6 2010年 [目的]研究猪NCOA1基因的PCR-RFLP多态性,为猪的分子育种和标记辅助选择提供理论依据。[方法]以81头山东寿光六和原种猪场的长白猪为研究对象,采取常规酚-氯仿抽提法从猪耳组织提取基因组DNA,以基因组DNA为模板进行PCR扩增获得440bp的NCOA1基因目的片段,利用限制性内切酶RsaⅠ对PCR产物进行酶切和琼脂凝胶电泳检测,并计算各等位基因频率和基因型频率。[结果]琼脂糖电泳检测酶切产物出现3种基因型:AA型(1条带:440bp)、AB型(3条带:440、282、158bp)、BB型(2条带:282、158bp);基因型频率分别为0.54、0.43和0.03;A和B2个等位基因的基因频率分别为0.76和0.24。[结论]该研究猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率较高。 侯永刚 闫守庆 何晓波 柏蒙蒙 孙泰雷 吴明明 孙金海关键词:NCOA1基因 PCR-RFLP 多态性 AC2卫星DNA在家猪13/17罗伯逊易位研究中的应用 引言罗伯逊易位包含罗伯逊融合和罗伯逊断裂两个内容,融合和断裂的位置都位于着丝粒处。目前尚无确切的理论来解释各种罗伯逊易位产生的分子机制以及所带来遗传效应,但比较肯定的是各种罗伯逊易位所产生 何晓波 侯永刚 孙泰雷 柏蒙蒙 孙金海关键词:家猪 卫星DNA 荧光原位杂交 文献传递 红褐色貉MC1R基因的序列分析 引言MC1R称促黑素细胞激素受体,是一种由317个氨基酸构成的肽类物质,属于G-蛋白偶联受体,具有7次跨膜结构。该受体可与内源配体促黑激素或Agouti蛋白相结合,在哺乳类动物黑色素细胞合成黑色素的过程中起 柏蒙蒙 何晓波 侯勇刚 孙泰雷 吴明明 孙金海关键词:毛色 单核苷酸 MC1R 文献传递 家猪FSHβ基因的多态性分析 本试验运用分子生物技术时猪促卵素基因型进行检测.以108头家猪为试睑对象,采用常规酚.氟仿抽提法从耳组织提取基因组DNA,摸索出合适的检测条件,以基因组DNA为模板进行PCR扩增获得FSHβ基因目的片段.然后对扩增产物进... 柏蒙蒙 何晓波 侯永刚 孙泰雷 孙金海关键词:分子生物 基因多态性 多态性分析 家猪 文献传递 13/17罗伯逊易位猪生长抑素基因的多态性研究 被引量:1 2009年 采用微量全血培养法制备染色体标本,对13/17罗伯逊易位猪的3种杂交组合的309头后代进行核型鉴定,结果样本中存在3种核型的猪:正常核型猪(2n=38)、易位杂合子猪(2n=37)和易位纯合子猪(2n=36);利用PCR-SSCP技术检测发现生长抑素基因外显子1不存在多态性;其内含子的266~602 bp片段存在2个突变位点(T520C,G521T),但仅检测到2种基因型:AA和AB。遗传多态性分析结果表明,不同杂交组合后代及不同核型的猪群中AA基因型频率(频率范围为0.58~0.77)和A等位基因频率(频率范围为0.79~0.90)均显著高于其AB基因型频率(0.23~0.42)和B等位基因频率(0.10~0.21);易位杂合子猪的AB基因型频率(0.42)均高于正常猪(0.25)及易位纯合子猪(0.40)。经卡方检验,差异不显著(P〉0.05),群体的基因型频率处于哈代-温伯格平衡状态。 赵雯 姜丽花 何晓波 张廷荣 孙金海关键词:罗伯逊易位 内含子 SSCP 单核苷酸多态性