杨永光
- 作品数:24 被引量:68H指数:4
- 供职机构:广东医学院附属医院更多>>
- 发文基金:博士科研启动基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
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- 门静脉注射超声微泡促进肝脏EGFP质粒表达
- 2011年
- 目的探讨门静脉注射超声微泡对肝脏增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒表达的影响。方法 48只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为3组,每组16只。A组经尾静脉注射EGFP裸质粒,B、C组分别经尾静脉和门静脉导管注射微泡与EGFP质粒混悬液,同时按设定参数和时间超声辐照肝区。转染后第1、3、7、11天每组随机处死4只大鼠,肝组织冰冻切片,荧光显微镜观察EGFP表达。结果 3组大鼠转染后第1天发现少量荧光,第3天达高峰;A组于第7天荧光基本消失,B、C组第7天仍持续表达。第3、7天,B、C两组转染率较A组明显增加(P<0.05),第3天C组的转染率较B组也有增加(P<0.05)。结论门静脉注射超声微泡可显著提高肝脏EGFP质粒转染率,可作为一种安全、有效的靶向基因体内转运载体。
- 吴桂林李明意孙丕绛徐晓红林满洲杨永光张谷裕刘国华徐浩
- 关键词:超声微泡增强型绿色荧光蛋白转染
- MMP9、TIMP1基因在原发性肝癌中的表达被引量:3
- 2007年
- 目的探讨MMP9、TIMP1基因在原发性肝癌中的表达状况及其对肝癌侵袭转移的影响。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例肝癌和相应癌旁组织及12例正常肝组织中MMP9、TIMP1mRNA表达水平。结果正常肝组织中MMP9仅有少量表达,与癌旁组织相比无显著差异;肝癌组织中MMP9表达明显升高,而TIMP1表达显著下降,两者表达状况呈负相关(P<0.01),且两者在转移肝癌较未转移肝癌中表达水平亦有显著性差异(P<0.05)。结论MMP9、TIMP1表达改变可能与肝癌侵袭转移的发生发展有一定关系。
- 李明意姚金科杨永光
- 关键词:MMP9TIMP1原发性肝癌
- 诊断超声照射对大鼠早孕胚胎组织细胞Caspase-3表达的影响
- 2013年
- 目的了解诊断超声照射对大鼠早孕胚胎组织细胞Caspase-3表达的影响。方法 40只孕7 d SD大鼠随机分为4组,用3.5 MHz超声持续照射腹部子宫体表投影区,分别照射0、10、20、30 min,超声照射后24 h取胚胎组织,用SP免疫组织化学检测Caspase-3蛋白表达。结果超声照射20、30 min组,Caspase-3表达明显高于对照组(P<0.01)。结论经腹诊断超声持续照射大鼠早孕胚胎超过20 min可使Caspase-3蛋白表达增高,从而可能导致早孕胚胎组织细胞凋亡。
- 刘丽娟徐晓红杨永光
- 关键词:超声CASPASE-3胚胎
- 10~23脱氧核酶沉默Survivin基因表达诱导人肝癌细胞的凋亡被引量:4
- 2009年
- 目的研究脱氧核酶沉默Survivin表达对人肝癌BEL-7402细胞凋亡的影响。方法合成针对Survivin基因的"10~23"型脱氧核酶及其类似物;转染肝癌细胞;RT-PCR检测脱氧核酶细胞内Survivin mRNA的切割作用;荧光免疫法测定脱氧核酶对Survivin蛋白表达影响;流式细胞术检测脱氧核酶对肝癌细胞凋亡的影响。结果"10~23"型脱氧核酶及其类似物成功转染入肝癌;非修饰脱氧核酶(DzT)和修饰的脱氧核酶(DzTi)能有效抑制肝癌细胞的生长(P<0.05);DzT和DzTi在胞内能有效地切割Survivin mRNA,DzTi比DzT的切割活性更显著;荧光免疫法测的DzT和DzTi能显著的下调Survivin蛋白水平(P<0.01);流式细胞术结果提示,DzT和DzTi细胞凋亡率明显升高出现凋亡峰(P<0.05);DzT和DzTi组细胞出现细胞周期阻滞,表现为G0/G1细胞所占比例上升,S期细胞所占比例下降。结论脱氧核酶能有效沉默Survivin mRNA表达,抑制Survivin蛋白表达和促进肝癌细胞凋亡。
- 杨永光李明意赵家明刘丽娟戴东
- 关键词:脱氧核酶SURVIVIN基因
- 靶向bcl-2基因Stealth^TM RNA干扰诱导肝癌细胞凋亡的作用被引量:3
- 2008年
- 目的应用RNA干扰技术,构建靶向bcl-2基因Stealth^TMRNA,转染人人肝癌细胞株,探讨RNA干扰诱导人肝癌细胞凋亡的机制。方法确定并合成3对人肝癌bcl-2基因干扰序列;脂质体法转染入肝癌细胞株内;荧光显微镜下观察转染细胞并计算转染率;倒置显微镜下观察转染前后细胞形态学的改变;SP免疫细胞化学技术检测Stealth^TM RNA处理前后细胞bcl-2蛋白表达变化;流式细胞术检测Stealth^TM RNA干扰对癌细胞凋亡和周期的影响。结果各组转染成功,荧光镜下显清晰的绿色荧光;各转染组转染率与时间有关,各组48h的转染率最高(P〈0.01);转染组间Stealth^TM RNAⅠ组的转染效率最高(P〈0.01);倒置显微镜下观察见转染后见部分细胞边缘圆,折光度降低,细胞增殖减慢且易脱落;未转染组细胞呈上皮性贴壁生长,生长旺盛。免疫细胞化学显示,Stealth^TM RNA干扰后各转染组发现细胞的bcl-2表达减弱,与未转染组比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。流式细胞术结果示,各转染组细胞凋亡率明显升高,并出现凋亡峰,Stealth^TM RNAⅠ、Ⅱ、Ⅲ组的凋亡率分别为(27.87±4.51)%、(24.50±0.89)%和(26.03±0.57)%,与未转染组细胞凋亡率(3.20±1.71)%,差异有统计学意义(P〈0.01)。各转染组细胞发生显著的细胞周期阻滞,表现为S期细胞明显减少,G0/G1细胞明显增多。结论靶向bcl-2基因Stealth^TM RNA成功的转染入肝癌细胞中,bcl-2蛋白表达受抑制,并明显的诱导癌细胞发生凋亡。
- 李明意杨永光赵家明杨展
- 关键词:RNA干扰BCL-2脱噬作用
- 壶腹癌并病理性胆肠瘘的术前诊断和治疗:附12例报告被引量:5
- 2008年
- 目的探讨壶腹癌并病理性胆肠瘘的临床表现,以提高其术前诊断率。方法回顾性分析近9年间以壶腹部癌收治人院,术中诊断合并病理性胆肠瘘12例患者的临床资料。结果所有患者术前临床无阻塞性黄疸的症状及体征。B型超声检查提示壶腹部占位并肝内外胆管扩张,胆囊萎缩,与周围组织粘连,轮廓不清。胆肠瘘均在术中确诊,胆囊十二指肠瘘7例,胆囊结肠瘘5例,瘘口直径为0.4~2.8cm。4例行根治;8例姑息性手术。术后病理证实均为壶腹癌。结论对于超声检查有上述发现的老年患者,若临床无阻塞性黄疸的表现,往往反映病理性胆肠瘘存在。
- 杨永光李明意戴东许刚林满洲
- 关键词:黄疸阻塞性
- 脱氧核酶抑制COX-2基因表达并促进人肝癌细胞的凋亡被引量:1
- 2007年
- 目的探讨利用脱氧核酶切割环氧化酶-2(COX-2)mRNA来抑制其基因表达以及对人肝癌细胞凋亡的影响。方法合成针对COX-2基因的“10~23”型脱氧核酶及其类似物,提取人肝癌细胞总RNA在胞外切割COX-2mRNA,检测其胞外切割活性;转染肝癌细胞,检测其在细胞内的切割活性及对细胞凋亡的影响。用RT-PCR检测COX-2和凋亡相关基因bcl-2、bax的mRNA水平,用荧光免疫方法测定相应的蛋白水平。结果非修饰脱氧核酶DzT和修饰的脱氧核酶DzTi(在DzT的3′末端添加倒位连接的T碱基)在胞外切割反应中能够有效地切割COX-2mRNA;在转染进入肝癌细胞后,DzTi比DzT显示更强的切割活性,显著地下调细胞内COX-2蛋白水平(P〈0.01)和bcl-2蛋白水平(P〈0.05),上调bax蛋白的表达(P〈0.01),抑制肝癌细胞的生长(P〈0.05)。脱氧寡核苷酸DzT′和DzTi′是由对DzT和DzTi的催化区进行碱基替换而成,在胞外和胞内均不能切割COX-2mRNA和促进肝癌细胞的凋亡。结论脱氧核酶能够有效切割COX-2mRNA,抑制COX-2蛋白表达和促进肝癌细胞凋亡,有可能作为COX-2抑制剂用于医学临床。
- 李明意赵家明杨展王旭光杨永光
- 关键词:脱氧核酶环氧化酶-2
- 声脉冲辐射力弹性成像在颈部淋巴结良恶性诊断中的价值被引量:2
- 2015年
- 目的探讨声脉冲辐射力成像(ARFI)中声触诊组织成像(VTI)与声触诊组织定量(VTQ)技术在颈部淋巴结良恶性鉴别诊断中的应用价值。方法分析65例100个颈部淋巴结疾病患者的常规超声及ARFI成像特征,测量淋巴结VTI图像与二维图像面积比及其SWV值,以病理学结果作为金标准,绘制ROC曲线,获得区分颈部淋巴结良恶性VTI面积比值及SWV的临界值。结果 5个常规超声评价指标中P<0.01的有短径/长泾、淋巴门及微钙化,它们在常规超声鉴别颈部淋巴结良恶性的敏感度、特异度及准确度分别为84.81%,90.47%,86%;86.07%,95.23%,88%;0,52.38%,11%。非特异性反应性淋巴结组VTI面积比为1.07±0.26,恶性淋巴结组的VTI面积比为1.68±0.31,两者相比差异具有统计学意义(T=8.9356,P<0.001)。非特异性反应性淋巴结组的SWV值为1.72±0.89 m/s,恶性淋巴结组的SWV值为2.68±0.48 m/s,二者比较差异具有统计学意义(T=4.7141,P<0.001)。构建VTI及SWV的ROC曲线后,其AUC分别为0.799和0.862,根据ROC曲线选取鉴别良恶性淋巴结的VTI面积比及SWV值的临界值分别为1.2、1.9,其对应的敏感度、特异度、准确度分别为96.20%,95.23%,96%;89.87%,90.47%,90%。结论 ARFI弹性成像有助于鉴别颈部淋巴结的良恶性。
- 刘丽娟徐晓红杨永光戴海霞刘尔球程锐
- 关键词:声脉冲辐射力成像常规超声颈部淋巴结
- 桥式胆肠内引流术在肝门部恶性梗阻姑息治疗中的应用:附12例报告被引量:1
- 2012年
- 目的:探讨桥式胆肠内引流术在无法切除肝门部恶性梗阻患者术中应用的疗效、安全性。方法:回顾性分析2005年5月—2011年5月12例肝门部恶性梗阻患者剖腹探查行姑息性桥式胆肠内引流术的临床资料。结果:12例肝门部胆管恶性梗阻患者均一次置管成功,引流有效率100%(12/12),并发症发生率8.3%,其中胆瘘1例(1/12),中位生存时间330 d。结论:对于不能切除肝门部恶性梗阻患者,桥式胆肠内引流术是一种简单、安全、有效的减黄方法。
- 杨永光刘丽娟曾连山莫艾李明意
- 关键词:胆管梗阻胆肠内引流术
- Stealth^(TM) RNAi沉默人肝癌细胞Bcl-2表达抑制体外移植瘤生长的研究被引量:1
- 2008年
- 目的探讨StealthTM RNAi抑制Bcl-2基因表达对体内移植瘤生长的影响。方法通过合成的人肝癌Bcl-2基因干扰序列转染入肝癌细胞内并从皮下移植到裸鼠,免疫组化检测瘤组织中Bcl-2蛋白的表达。结果荧光显微镜下显清晰的绿色荧光为转染成功细胞;RT-PCR检测转染组Bcl-2基因mRNA的表达水平下调(P<0.01)。转染StealthTM RNA裸鼠皮下移植肿瘤生长缓慢,与对照组瘤体积比较差异有显著性(P<0.01);采用免疫组化法检测注射StealthTM RNA组,Bcl-2蛋白的表达下调(P<0.01)。结论StealthTM RNAi可抑制Bcl-2基因表达,对移植瘤的生长有抑制作用。
- 杨永光李明意许刚刘丽娟戴东孙丕绛
- 关键词:肝癌细胞BCL-2