张海峰
- 作品数：17 被引量：31H指数：3
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- ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩被引量：4
- 2011年
- 目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blotting检测ClC-3蛋白表达,活细胞图像系统分析对照组和ClC-3 siRNA组细胞在低渗(160mOsm/L)刺激时的容积调节能力。结果 ClC-3 siRNA转染率为(63.8±3.8)%(n=3,P<0.01),与对照组相比,ClC-3氯通道蛋白的表达减少(60.9±4.0)%(n=3,P<0.01)。对照组细胞的RVD为(42.6±2.8)%(n=20),ClC-3 siRNA组细胞在低渗液中的最大容积与对照组没有显著性差异,但RVD仅为(10.5±4.8)%,RVD抑制率达75.4%(P<0.01)。结论 ClC-3 siRNA成功转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,特异性抑制ClC-3蛋白表达,显著降低细胞RVD能力,提示ClC-3氯通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用。
- 叶东张海峰朱林燕王立伟陈丽新
- 关键词：SIRNA鼻咽癌细胞细胞容积
- ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩
- Cl通道在细胞的调节性容积回缩（RVD）功能中起重要作用,但参与RVD的Cl通道的蛋白分子本质目前还不清楚,本文用siRNA沉默ClC-3 Cl通道,探讨ClC-3 Cl通道是否参与鼻咽癌CNE-2Z细胞RVD。实验使用...
- 叶东张海峰王立伟陈丽新
- 关键词：SIRNA鼻咽癌细胞细胞容积
- 文献传递
- 低渗诱导高分化鼻咽癌细胞CNE-1容积激活性氯电流被引量：4
- 2009年
- 目的:研究细胞外低渗诱导的高分化鼻咽癌细胞CNE-1的容积激活性氯电流。方法:全细胞膜片钳记录氯电流,通过应用氯通道阻断剂、离子置换和改变细胞容积方法研究该电流的特性。结果:当细胞在等渗环境中背景电流微弱且稳定,细胞外给予47%低渗刺激后电流迅速增大,呈外向优势,对阴离子通透性的大小为:I->Br->Cl->葡萄糖酸。氯通道阻断剂ATP和NPPB可逆性地抑制此电流,ATP的抑制作用在外向电流显著强于内向电流。此电流对细胞容积改变敏感,细胞肿胀时被激活,细胞发生皱缩时则被抑制。结论:细胞外低渗诱导CNE-1细胞产生氯电流,此电流对细胞容积的改变敏感,在CNE-1细胞容积调节中起重要作用。
- 朱林燕左婉红张海峰陈丽新王立伟
- 关键词：鼻咽肿瘤氯化物通道膜片钳术
- 细胞周期蛋白D1重组质粒的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达被引量：3
- 2010年
- 目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质粒转染到低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞,诱导其表达,免疫荧光、Western blotting等鉴定其表达。结果电泳获得918bp预期片段,重组质粒经酶切、PCR和测序分析证实含有周期蛋白D1完整读码框,将重组质粒导入CNE-2Z细胞并成功表达,目的蛋白经免疫荧光和Western blotting鉴定具有生物学活性。结论成功克隆并构建含周期蛋白D1基因的真核表达GFP质粒,为进一步研究周期蛋白D1在鼻咽癌CNE-2Z细胞中的作用奠定基础。
- 柏志全张海峰陈丽新朱林燕左婉红和树同王立伟
- 关键词：细胞周期蛋白D1绿色荧光蛋白质粒构建免疫荧光免疫印迹
- 氯通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨氯离子通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡过程中的作用。方法采用MTT比色法检测细胞增殖,Hoechst 33342染色法分析细胞凋亡,全细胞膜片钳技术记录氯电流。结果藤黄酸明显抑制CNE-2Z细胞增殖,其抑制作用呈时间和浓度依赖性,IC50为3.1μmol/L;8μmol/L藤黄酸诱导细胞凋亡作用可被氯离子通道阻断剂NPPB和Tamoxifen抑制。藤黄酸诱发CNE-2Z细胞产生一个有明显外向优势的氯电流,可被NPPB明显抑制。结论藤黄酸可能通过激活氯离子通道而诱导CNE-2Z细胞凋亡和抑制细胞增殖,提示氯通道参与藤黄酸诱导的细胞凋亡。
- 柏志全李华荣张海峰刘善文朱林燕叶文才陈丽新王立伟
- 关键词：藤黄酸鼻咽癌细胞凋亡氯离子通道膜片钳技术
- Polarized calcium signaling in directional migration of human hepatocellular carcinoma cells
- Directional migration is a property common to malignant carcinoma cells and is critical for cancer metastasis....
- 杨林杰张海峰叶东罗海朱林燕陈丽新王立伟
- 文献传递
- Polarized calcium signaling in directional migration of human hepatocellular carcinoma cells
- 杨林杰张海峰叶东罗海朱林燕陈丽新王立伟
- ClC-3在紫杉醇诱导鼻咽癌细胞凋亡早期中的作用
- <正>目的:建立紫杉醇诱导的低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞早期凋亡模型,探讨ClC-3在细胞凋亡早期中的作用,及其对细胞膜物理特性的影响。方法:Annexin V-FITC/PI双染观察紫杉醇诱导CNE-2Z细胞凋亡情况,...
- 张海峰滕双凤杨丽丽邓志钦王立伟
- 关键词：紫杉醇CLC-3膜片钳原子力显微镜激光共聚焦显微镜
- 文献传递
- 氯通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌细胞凋亡中的作用
- 目的 藤黄酸(gambogic acid,GA)是中药藤黄的主要活性成份,其有显著的抗癌作用和低细胞毒性.本研究探讨氯离子通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡过程中的作用.方法 采用MTT比色法检测细胞增殖,...
- 柏志全李华荣张海峰朱林燕陈丽新王立伟
- 关键词：藤黄酸鼻咽癌细胞凋亡氯离子通道膜片钳
- 氯通道阻断剂和白头翁皂苷的协同溶血作用
- <正>目的:研究氯通道阻断剂对白头翁皂苷溶血的影响。方法:用细胞图像软件记录并分析白头翁皂苷的溶血过程,检测红细胞溶血率,并观察氯通道阻断剂对白头翁皂苷溶血的影响,结果:白头翁皂苷药物引起人红细胞溶血,溶血作用呈浓度依赖...
- 滕双凤刘振锋厉冰雪张海峰黄维渊邓志钦叶文才陈丽新王立伟
- 关键词：氯通道阻断剂溶血作用
