安梦楠
- 作品数：55 被引量：77H指数：6
- 供职机构：沈阳农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：辽宁省烟草专卖局科技攻关项目国家自然科学基金中国烟草总公司科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 烟草突变株SN01、SN02抗PVYN相关基因的克隆及表达分析
- 烟草抗病突变株SN01、SN02为本实验室筛选获得的高抗PVYN (potato virus Y vein necrosis strain)的具有自主知识产权的烟草新种质.为了进一步明确其抗PVYN的分子机制,本文研究其...
- 朱丹安梦楠赵艳琴赵秀香吴元华
- 关键词：克隆
- 重组酶聚合酶扩增技术在植物病毒检测中的应用被引量：13
- 2022年
- 随着分子生物学技术的发展,多种核酸等温扩增技术逐渐被开发出来。其中,重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)作为一种快速、灵敏的检测技术具有很大的优势。目前,RPA已应用于转基因生物、各类病原物及食品安全检测等多个领域,并作为新兴技术在植物病毒检测领域中快速发展。RPA技术只需一对引物,在恒温条件下(37-42℃)只需30 min左右即可完成反应,具有较高的灵敏度与特异性。因此,该技术正迅速成为一种能够用于条件有限的实验室或现场植物病毒检测的手段。本文介绍了RPA技术的检测原理、引物设计和应用方式,综述了其在植物病毒检测中的最新研究进展及存在的问题,为RPA技术在植物病毒检测中的应用提供参考。
- 罗雪琮安梦楠吴元华夏子豪
- 关键词：植物病毒
- 烟草花叶病毒p126蛋白质多克隆抗体制备及免疫印迹检测研究
- 烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)是烟草花叶病毒属(Tobamovirus)中的代表性病毒之一,其编码的与复制相关的126kDa蛋白(p126)在病毒复制、重组修复和基因表达中起着重要作用。...
- 李艳丽李晓冬安梦楠吴元华
- 关键词：多克隆抗体烟草花叶病毒原核表达
- 文献传递
- 嘧肽霉素诱导烟草BY-2悬浮细胞防卫反应的研究被引量：2
- 2018年
- [目的]利用烟草BY-2悬浮细胞研究抗病毒新农药2%嘧肽霉素水剂诱导植物防卫反应的机制。[方法]用不同质量浓度的嘧肽霉素处理悬浮细胞,分光光度法测定胞外H2O2产生的动态过程及RT-q PCR方法测定防卫反应基因表达。[结果]烟草BY-2悬浮细胞经嘧肽霉素处理,产生活性氧迸发,并在处理1 h后达到高峰;嘧肽霉素能诱导细胞的FLS2、MAPKKK、PR1、NPR1和HSP70的上调表达,其中HSP70的上调效果最为显著。[结论]嘧肽霉素可通过诱导植物防卫反应相关基因的表达,达到诱导植物抗病毒病的作用。
- 郭依安梦楠吴元华
- 关键词：嘧肽霉素活性氧防卫反应
- 烟草PVYN辽宁分离物全序列测定与分析被引量：2
- 2013年
- 利用引起烟草脉坏死病的马铃薯Y病毒脉坏死株系辽宁分离物(Potato virus Y—vein necrosis strain Liaoning isolate,PVYN-LN),以GenBank中已有的PVY全序列为基础,设计特异引物。通过总RNA提取、RT-PCR、3’RACE和5’RACE扩增及序列测定,测得PVYN-LN全长基因组序列(NCBI登录号为JQ971975)包括9714个碱基(含PolyA尾),整条序列仅包含一个由9186个碱基组成的开放读码框(ORF),编码一条包含3061个氨基酸的多聚蛋白。对所得序列进行BLAST,利用MEGA软件对所测得的PVYN-LN全序列与GenBank中已有的PVY全序列及氨基酸进行系统进化分析,发现PVYN-LN分离物与已报道的PVYN株系具有较高的进化亲缘关系,该分离物属于PVYN株系。序列重组分析软件RDP4分析,该序列无重组。
- 王芳高正良周本国许大凤安梦楠吴元华
- 关键词：烟草基因组全序列
- 辣椒轻斑驳病毒葫芦岛分离物RNA杂交检测体系的建立被引量：3
- 2018年
- 辣椒轻斑驳病毒(pepper mild mottle virus,PMMoV)可引起辣椒叶片以及果实的花叶和畸形症状,造成相当的经济损失。为了建立辣椒轻斑驳病毒的高特异性和灵敏度的分子检测体系,采用非放射性的化合物地高辛(DIG)标记检测PMMoV正义链的RNA探针,建立了该病毒Dot blot杂交和Northern blot杂交检测体系,并通过RT-PCR法验证了杂交体系的检测特异性。结果表明,RNA探针对PMMoV具有很高的检测特异性和灵敏度,适用于病毒的早期检测以及相关分子研究。
- 周涛于曼张鑫宇安梦楠吴元华
- 关键词：辣椒轻斑驳病毒特异性检测DOTNORTHERNRNA探针
- 辽宁省BBWV2的鉴定与RPA检测方法的建立与应用
- 蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus 2,BBWV2)属蚕豆病毒属(Fabavirus),能够侵染多种重要的经济植物,造成重大经济损失。本研究通过小RNA高通量测序与RT-PCR检测在辽宁省沈阳市...
- 罗雪琮安梦楠吴元华夏子豪
- 关键词：病毒检测
- 烟草原生质体制备体系的优化及PVY^N导入研究被引量：1
- 2015年
- 植物原生质体是除去细胞壁后仍具有活力的裸露单细胞,其在植物RNA病毒的复制机理研究方面具有广泛的应用。为了获得高产、高活力的烟草原生质体,以烟草(Nicotiana tabacum Linn.)品种K326为材料,对原生质体制备体系中的不同细胞壁酶解液成分、酶解时间、酶解渗透压稳定剂含量、离心时间以及离心转速等因素进行优化。结果表明:在含1%纤维素酶,0.5%离析酶,0.6mol·L-1甘露醇的酶解液中,26℃慢速震荡(40r·min-1)酶解4h,700r·min-1离心3min,得到产量及活力较高的原生质体,可直接用于植物病毒的接种试验;利用聚乙二醇(PEG)融合法向获得的高活力原生质体中接种马铃薯Y病毒N株系(Potato virus Y necrosis strain,PVYN),经培养后提取总RNA,通过PVYN特异性引物经RT-PCR扩增后检测条带明显,表明PVYN成功导入烟草原生质体并自我复制。
- 吴元华董雪安梦楠苏燕妮李晓冬
- 关键词：烟草原生质体制备
- 烟草靶斑病抗病相关基因克隆及表达分析
- 烟草靶斑病是我国新报道的由立枯丝核菌（Rhizoctonia solani AG-3）引起的叶部真菌病害,近年东北地区爆发流行,对烟叶产量和品质均造成了很大的损失。NBS类抗病基因是从植物中克隆到的最大一类抗病基因,在植...
- 苏燕妮董雪李晓冬安梦楠吴元华
- 关键词：抗病基因同源序列实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 烟草靶斑病菌内切多聚半乳糖醛酸酶基因endoPGs的克隆及表达特征分析被引量：6
- 2014年
- 【目的】内切多聚半乳糖醛酸酶(endo polygalacturonases,endoPGs)是重要的致病因子之一。论文从烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)强致病力菌株YC-9和弱致病菌株LF-2中克隆该致病基因,分析比较该基因的序列特征、进化关系和表达特性,研究其在与烟草互作过程的致病作用。【方法】通过比较GenBank中不同植物病原真菌的endoPGs序列设计简并引物,首先获得菌株YC-9及LF-2的endoPGs基因片段,再采用RACE技术克隆获得其cDNA全长序列;生物信息学分析比较其保守结构域及序列特征;采用MEGA 4.0软件构建endoPGs的系统进化树;通过real-time RT-PCR技术对强致病力菌株YC-9及弱致病力菌株LF-2的endoPGs与烟草K326互作的表达特性进行研究。【结果】克隆获得了烟草靶斑病菌强致病力菌株YC-9和弱致病力菌株LF-2的endoPGs的cDNA全长序列,分别命名为endoPG1和endoPG2,开放阅读框(ORF)长度均为1 086 bp,编码361个氨基酸;比较分析表明endoPG1和endoPG2的推测蛋白均具有PLNO3003基因家族保守结构域,其跨膜结构间存在差异;成功构建了该基因系统进化树,结果表明来自烟草靶斑病菌的endoPGs构成独立分支,且烟草靶斑病菌endoPG1及endoPG2同源关系最近;real-time RT-PCR表达特性分析结果显示,靶斑病菌endoPG1和endoPG2与烟草互作(接种)之后该基因的表达与未互作(不接种)的对照样品相比均呈明显上调趋势,同时endoPG1表达迅速且高于endoPG2。【结论】烟草靶斑病菌强致病力菌株YC-9及弱致病力菌株LF-2的内切多聚半乳糖醛酸酶基因均具有PLNO3003基因家族的保守结构域,其推测蛋白的跨膜结构间存在差异,该推测蛋白与烟草靶斑病菌同源关系最近,且endoPG1和endoPG2的推测蛋白的同源性最高;内切多聚半乳糖醛酸酶基因的表达受与烟草互作的诱导,在不同致病力菌株中存在明显差异。
- 赵艳琴吴元华赵秀香陈建光伏颖安梦楠
- 关键词：克隆基因表达
