国家教育部博士点基金(20050019006)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：中国农业大学中华人民共和国农业部更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新孢子虫SAG1-SRS2融合基因真核表达质粒的构建及表达被引量：1
- 2007年
- 根据犬新孢子虫NcSAG1-NcSRS2融合基因序列,设计了1对含有Kozak序列、终止密码子、BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物,以含有NcSAG1-NcSRS2融合基因的质粒pGEX-tNcP43-P36为模板,经PCR扩增获得NcSAG1-NcSRS2融合基因片段,用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切该片段,回收得到含有以上2个酶切位点黏端的NcSAG1-NcSRS2融合基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pcDNA3.1(+)真核表达载体中,获得重组质粒pcNCSAG1-SRS2。经PCR鉴定、限制性内切酶酶切分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性。将构建好的真核表达质粒转染到COS-7细胞中进行瞬时表达,经免疫荧光检测,证实了该载体能在细胞内进行蛋白表达。
- 卢计委刘群汪明
- 关键词：犬新孢子虫真核表达
- 乳牛流产胎儿中新孢子虫的鉴定被引量：10
- 2007年
- 在血清学调查的基础上,进行了流产胎牛体内新孢子虫的鉴定。取新孢子虫血清抗体阳性乳牛的流产胎牛的脑、心、肺、脾、肝等组织进行病理学检查,经HE染色观察到脑组织中存在类似于新孢子虫包囊样结构,经免疫组织化学染色排除刚地弓形虫包囊的存在,确认该包囊为新孢子虫包囊。同时提取流产胎牛脑组织DNA,应用新孢子虫特异性引物Np6/Np21进行PCR扩增,扩增出的特异性目的条带的序列与新孢子虫标准株Nc-1的gene 5序列的一致性为98%。首次证实我国大陆流产胎牛脑组织中存在新孢子虫。
- 邓冲张维刘群胡东梅遇秀玲刘晶
- 关键词：新孢子虫流产乳牛
- Balb/c小鼠新孢子虫病动物模型的建立及在其体内发育过程的研究被引量：4
- 2009年
- 【目的】建立Balb/c小鼠感染新孢子虫的急性和亚急性发病模型,并研究新孢子虫在小鼠体内的发育过程。【方法】分别对两组小鼠腹腔接种新孢子虫8×106个/只和5×105个/只,接种后小鼠进行定时宰杀,取心、肝、肺、脑和后肢肌肉等进行组织病理学、免疫组织化学和PCR检测。【结果】发现Balb/c小鼠感染后病理变化主要表现为各器官组织的广泛性出血,非化脓性脑炎和肝细胞空泡变性。接种后第16天观察到脑组织内包囊,在其它组织中未观察到包囊样结构。PCR检测结果显示,接种后12h即可检测到肺脏和心脏组织内的新孢子虫特异性基因Nc-5,脑内最早于第8天检测到。接种25d后在肝脏、肺脏和脑内仍能检测到新孢子虫基因。综合观察和检测结果,发现新孢子虫对肝脏、肺脏和脑组织有一定的组织亲嗜性;雄性小鼠对新孢子虫更为敏感。【结论】成功建立了新孢子虫感染Balb/c小鼠的急性和亚急性发病的动物模型;跟踪观察了新孢子虫在小鼠体内各器官组织出现时间、持续时间以及分布的规律,初步掌握了新孢子虫在其体内发育的动态过程。
- 邓冲张维刘群刘晶丁隽
- 关键词：新孢子虫病BALB/C小鼠动物模型发育
- 巢式PCR检测奶牛流产胎儿体内的新孢子虫
- 为了解新孢子虫病在奶牛流产中所起作用,了解流产胎儿体内新孢子虫的分布情况,对北京等地区奶牛的流产胎儿脏器进行巢式PCR检测。将流产胎牛的检测结果与对母牛的血清ELISA检测结果进行对比。结果:流产胎儿体内新孢子虫DNA检...
- 姚雷杨娜张维钱伟峰胡月凤丁隽刘群
- 关键词：新孢子虫ELISA巢式PCR
- 文献传递
